雙軸細胞拉伸儀是研究細胞在受到機械壓力、拉力或其它機械刺激時的各種形變,目前已經(jīng)成為一門前沿科學(xué)研究項目,為此科學(xué)家研發(fā)出很多裝置用于拉伸細胞,它可以在體外環(huán)境模擬體內(nèi)的拉伸狀態(tài)等條件來滿足以上細胞的生長。
雙軸細胞拉伸儀主要實現(xiàn)模擬細胞在人體內(nèi)受到的生理牽張環(huán)境刺激下的細胞培養(yǎng),也可以用于模擬非生理狀態(tài)下受到的牽張刺激,用來研究不同應(yīng)變狀態(tài)下的細胞應(yīng)激反應(yīng)。牽張應(yīng)變在人體內(nèi)目前主要有如心肌、肌肉纖維、血管舒張收縮等自主動作對自身及周圍細胞形成影響或者由外部作用如按摩,推拿等外力施加而產(chǎn)生對細胞的影響。
視網(wǎng)膜色素上皮(RPE)是視網(wǎng)膜的基本組成部分,在視覺功能中起著至關(guān)重要的作用。視網(wǎng)膜色素上皮的結(jié)構(gòu)和功能受損會導(dǎo)致多種視網(wǎng)膜疾病,目前尚無治療這些疾病的方法。因此,研究視網(wǎng)膜色素上皮的發(fā)育、功能與病理生物學(xué)之間的關(guān)系,對預(yù)防和治療視網(wǎng)膜疾病具有重要意義。
視網(wǎng)膜下纖維化是導(dǎo)致年齡相關(guān)性黃斑病變視力喪失的原因之一,抗血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)治療是目前對于濕性年齡相關(guān)性黃斑變性標(biāo)準(zhǔn)治療方案。實驗計劃通過觀察牽拉力誘導(dǎo)下RPE細胞血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的表達來探索機械應(yīng)力對其形成產(chǎn)生的作用。
設(shè)計實驗:根據(jù)不同大小牽拉力分為對照組(無牽拉力組)、A組(20%形變組)、B組(10%形變組)、C組(5%形變組)。各組依照不同的時間點收取樣本進行檢測。應(yīng)用實時熒光定量PCR檢測各組不同時間點(0、24、48h)VEGFAmRNA的表達情況,蛋白印跡法檢測(0、24、48h)VEGFA-165的表達以及ELISA方法檢測(0、12、24、36、48h)細胞上清液中VEGFA的分泌。